Rychlé vyšetření antimikrobní citlivosti přímo z hemokultivačních lahviček
31. květen 2019 | RNDr. Pavla Urbášková, CSc.
Doporučení EUCAST pro rychlé vyšetření antimikrobní citlivosti (RAST) s inokulem vyočkovaným přímo z pozitivních hemokultivačních lahviček:
- plotny pro vyšetření citlivosti diskovou difúzní metodou (MH, MH-F) se inokulují 100 - 150 μl neředěným bujónem přímo z pozitivní hemokultivační lahvičky (BD, bioMerieux a Thermo Fisher);
- plotny se inokulují stejně jako u standardní diskové difúzní metody EUCAST;
- inkubace se zkracuje na 4, 6 a 8 hodin s breakpointy přizpůsobenými každému inkubačnímu času;
- průměry zón se odečítají z horní strany plotny po sejmutí víčka;
- breakpointy jsou upraveny pro každý druh a pro každý čas odečítání;
- před interpretací výsledků vyšetření citlivosti musí být identifikován druh vyšetřovaného mikroba;
- metoda je v současné době validována pro následující druhy:
- Escherichia coli
- Klebsiella pneumoniae
- Pseudomonas aeruginosa
- Acinetobacter baumannii
- Staphylococcus aureus
- Streptococcus pneumoniae
- Enterococcus faecalis a Enterococcus faecium
- po pozitivním signálu by hemokultivační lahvička měla být zpracována v rozmezí 0 - 18 hodin;
- každý druh má vlastní RAST breakpointy a vlastní čas k odečítání (4, 6 a 8 hodin);
- po 4 hodinách nelze odečítat některé průměry zón. Odečítání se opakuje po 6 a 8 hodinách. Inkubaci nelze prodloužit. Jestliže výsledky nelze po 8 hodinové inkubaci interpretovat, použije se standardní vyšetření antibiotické citlivosti;
- průměry zón lze odečítat POUZE tehdy, je-li zřetelný okraj zóny - jinak se plotny reinkubují a odečítají po 6 nebo 8 hodinách;
- inhibiční zóny se odečítají v rozmezí ± 5 minut uvedeného času odečítání (4, 6 a/nebo 8 hodin). Je-li zapotřebí, plotny se do 10 minut dají znovu inkubovat, aby je bylo možno odečítat později (za 6 a/nebo 8 hodin);
- tabulka breakpointů je specifická pro RAST EUCAST - nelze používat obvyklé Tabulky breakpointů EUCAST a rychlou metodu vyšetření citlivosti nelze používat s inokulem připraveným z kolonií.
- Metoda - Rychlé vyšetření antimikrobní citlivosti přímo z hemokultivačních lahviček
- RAST: Screening mechanizmů rezistence významných pro epidemiologii a/nebo kontrolu infekcí
- EUCAST RAST Často kladené otázky
- Validované breakpointy pro krátkou inkubaci diskové difúzní metody přímo z pozitivních hemokultivačních lahviček.