cz
Chlamydie - vyšetřovací metody
17. duben 2007 | MUDr. Ljuba Janečková
Používané laboratorní metody diagnostiky
Detekce rodově i druhově specifických protilátek:
1). MIF ( mikroimunofluorescenční test, druhově specifický test )
- anti Chlamydia pneumoniae IgG, IgA, IgM
- anti Chlamydia trachomatis IgG, IgA, IgM
- anti Chlamydia psittaci IgG, IgA, IgM
2). ELISA test ( rodově specifický test )
- anti Chlamydia IgG, IgA, IgM
Přímý průkaz Chlamydia pneumoniae ( CPN ) a Chlamydia trachomatis ( CTR ):
1). Přímý průkaz DNA Chlamydia trachomatis a Chlamydie pneumoniae
2). Detekce antigenů CPN a CTR imunofluorescenčním testem ( IF test )
Průkaz DNA Chlamydia trachomatis metodou PCR ( Cobas Amplicor, Roche):
Vyšetřovací materiál:
| Moč | Do ster. nádobky 10-15 ml z prvního proudu ranní moči, | Skladování při 2-8°C, transport do 4 dnů. |
|
Výtěry: konjunktivální |
Štětička se vloží do sterilní zkumavky s 1 ml PBS | Transport do lab. do 24 hodin |
| endocervikální | (při 2-8 °C ) | |
| vaginální | event. skladovat při – 20°C. | |
| uretrální | ||
| nasofaryngeální | ||
| Sperma | Do ster.zkumavky 5-10 ml | 2-8°C do 24 hodin. |
| Výpotek | Do ster.zkumavky 5-10 ml | 2-8°C do 24 hodin. |
| Sérum , plná krev (experim.) | 3-10 ml nesrážlivé krve do ster. zkumavek | Transport do lab . při norm.teplotě – do 24 hod. Event. skladovat při +4°C max. 48 hodin. |
Průkaz DNA Chlamydia pneumoniae metodou PCR ( neakreditovaná metoda ):
Vyšetřovací materiál:
| Krev | Odebírá se 3-10 ml nesrážlivé krve do odběrových kontejnerů (např.Vacutainer nebo Sardstet) | Transport do laboratoře při normální teplotě , pokud možno do 24 hod. V případě nezbytnosti skladovat při |
| +4 °C max.48 hod. | ||
| Ostatní tělní tekutiny: | ||
| - Sputum | Odebírá se 1 ml do sterilních dobře uzavíratelných kontejnerů | Transport do lab. při norm.teplotě do 24 hodin. |
| - BAL | V případě nezbytnosti skladovat při +4°C max.5 dní, nebo při –20°C. | |
| - Likvor | ||
| - Oční tekutina | ||
| - Plodová voda | ||
| Výtěry: | Štětička se vloží do ster. zkumavky s 1 ml PBS | Transport do lab. při 2-8°C ,pokud možno do 24 hodin, event. skladovat při –20°C. |
| - nazofaryngeální | ||
| - konjunktivální | ||
| Biopsie,autopsie | Vzorek tkáně cca 0,5 cm3 se vloží do suchého ster. kontejneru. | Transportuje se do lab. na ledu do 24 hod., nebo se mrazí na suchém ledu a transportuje zmražený při –20°C. |
| Jehlová biopsie nebo biopsie z endoskopu | se vkládá do sterilní zkumavky s 0,5 ml PBS | Transportuje se do lab. na ledu do 24 hodin. |
Diagnostika infekcí C.pneumoniae se opírá hlavně o sérologická vyšetření ( detekce rodově a druhově specifických testů ). Poznámka: Protilátky IgM ( bez současné pozitivity IgA a/nebo IgG ) jsou většinou považovány za přímoinfekci. U některých dospělých osob mohou dlouhodobě přetrvávat IgM protilátky v rodově i druhově specifických testech ( často i s současnou pozitivitou IgA a IgG protilátek), příčinou může být dle některých autorů vysoká aktivita probíhající chronické infekce nebo intenzivní reinfekce, ale nelze vyloučit i nespecifitu. Přítomnost protilátek třídy IgG bez klinických příznaků je považována za sérologický obraz prodělané infekce .Důležitá je dynamika protilátkové tvorby - k jejímu zjištění je nutné vyšetření alespoň dvou sér: první na začátku onemocnění a druhý asi po 2 - 3 týdnech. Eventuálně i třetí vzorek - rekonvalescentní za 4 - 6 týdnů od počátku onemocnění. V prvních 6 - 8 měsících věku života je třeba počítat s možnosti přítomnosti transplacetárně přenesených protilátek ( pouze IgG !).
Pro detekci antigenu C.pneumoniae se používá imunofluorescenční test ( používají se druhově specifické monoklonální protilátky ).
Přímý průkaz DNA C.pneumoniae metodou PCR se používá prozatím spíš k výzkumným účelům.
U akutních infekcí , vyvolaných C.trachomatis metodou volby je přímý průkaz agens z klinického materiálu ( viz. tab.)
Průkaz protilátek proti druhově a rodově specifickým antigenům C. trachomatis je na místě u déletrvajících infekcí, zvláště při podezření na systémovou nebo ascendentní nákazu , při nepřítomností chlamydií v dolních urogenitálních cestách ( při použití přímých metod průkazu DNA C.trachomatis metodou PCR ).
